Bimoleküler Floresan Tamamlama (BiFC) tahlili, canlı hücre görüntüleme veya sabit hücreler kullanılarak protein-protein etkileşimini in vivo olarak doğrudan görselleştirmek için kullanılan bir yöntemdir. … BiFC ilk olarak Hu ve diğerleri tarafından tanımlanmıştır.
Bimoleküler floresan tamamlama nasıl çalışır?
BiFC'nin çalışma prensibi, bir floresan proteinin iki parçasının, parçalardaki protein-protein etkileşimi nedeniyle birbirine yakın olduklarında, yani bir floresan proteinin iki bölümünün birleşmesi sonucunda bir floresan kompleksinin geliştirilmesine dayanır., BiFC'de bir florofor amino ve karboksil terminal uçlarına bölünür.
BiFC testi nedir?
bimoleküler floresan tamamlama (BiFC) tahlili canlı hücrelerde protein etkileşimlerinin basit ve doğrudan görselleştirilmesini sağlar (45). BiFC yaklaşımı, bir floresan proteinin floresan olmayan parçalarına kaynaşmış iki protein birbiriyle etkileşime girdiğinde bir floresan kompleksinin oluşumuna dayanır (Şek.
BiFC testi neden yapılır?
BiFC fikri, ilgilenen proteinlerinizle kaynaşmış GFP'nin yarısını ifade etmektir POI'ler etkileşime girerse, işlevsel bir GFP elde etmek için her iki yarıyı da bir araya getirebilirsiniz. Yani hücrede ifade edilen bir GFP'nin yarısı varsa, bir GFP antikorunun onu tespit edebilmesine şaşırmadım.
BiFC tersine çevrilebilir mi?
BiFC komplekslerinin tersinmezliği iyi belgelenmiştir (10) ve hepsi olmasa da çoğu floresan protein- tabanlı BiFC sistemlerinin geri döndürülemez (8, 33, 43, 48–51).
